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    ELISA试剂盒使用方法讲解

    发布时间: 2016-12-12  点击次数: 2165次

    公司出产的ELISA试剂盒敏感性高,特异性强,重复性好。试剂盒中试剂安稳、易保留,操作简洁,成果判断较客观等要素,已广泛应用在免疫学查验的各领域中,检查意图:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。合适检查包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、安排匀浆等标本。
    ELISA试剂盒使用方法一
    双抗体夹心法
    1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反响孔中加0.1ml,4℃ 。次日,弃去孔内溶液,用洗刷缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗刷,下同)。
    2. 加样:加必定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反响孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗刷。(一起做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
    3. 加酶标抗体:于各反响孔中,参加新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗刷。
    4. 加底物液显色:于各反响孔中参加暂时制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
    5. 停止反响:于各反响孔中参加2M硫酸0.05ml。
    6. 成果判定:可于白色布景上,直接用肉眼调查成果:反响孔内色彩越深,阳性程度越强,阴性反响为无色或极浅,依据所呈色彩的深浅,以“+"、“-"号表明。也可测OD值:在ELISA检查仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
    ELISA试剂盒使用方法二
    间接法
    1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃;
    2.次日洗刷3次;
    3.加必定稀释的待检样品(不知道抗体)0.1ml于上述已包被之反响孔中,置37℃孵育1小时,洗刷;
    4.(一起做空白、阴性及阳性孔对照)于反响孔中,参加新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
    5.37℃孵育35-60分钟,洗刷;
    6.’zui终一遍用DDW洗刷。

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