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加样的各步优化:
A、一般情况下有三次加样,它们分别是加标本,加酶结合物,加底物。
B、冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。
C、制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、收缩后即可取得。D、也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。
E、一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。
ELISA试剂盒实验标本采集必修课:
1)不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2)标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验,若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3)细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)血清:使用不含热原的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
5)血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
6)组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
7)保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
研域(上海)化学试剂有限公司使我们对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得轻而易举,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性,并不与其它细胞因子反应,板内、板间变异系数均小于10%,保证高品质产品性能的同时,也能兼顾成本,为您节约实验经费。