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    上海研域生物实验室所需哪些免疫组化

    发布时间: 2017-06-21  点击次数: 1559次

    免疫组化实验试剂

    PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L.

    0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g.

    0.5mol/L EDTA缓冲液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml.

    1mol/L的TBS缓冲液(pH8.0):在800ml水中溶解121gTris碱,用1N的HCl调至pH8.0,加水至1000ml.

    酶消化液: a、0.1%胰蛋白酶液:用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液:用0.1N的HCl配制。

    3%甲醇-H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。

    封裱剂:

    甘油和0.5mmol/L碳酸盐缓冲液(pH9.0~9.5)等量混合

    油和TBS(或PBS)配制

    TBS/PBS pH9.0~9.5,适用于荧光显微镜标本;pH7.0~7.4适合于光学显微镜标本

    免疫组化实验操作流程:

    脱蜡和水化

    脱蜡前,应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。

    组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟,更换二甲苯后再浸泡10分钟;

    无水乙醇中浸泡5分钟

    95%乙醇中浸泡5分钟

    70%乙醇中浸泡5分钟

     

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