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    48T人白细胞介素-2ELISA 检测试剂盒

    发布时间: 2012-08-20  点击次数: 1201次

    人白细胞介素-2ELISA 检测试剂盒

    用 途:
        人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-2 。本试剂盒可以检测天然和重组的IL-2 。本试剂盒于科研、而非用于临床诊断。
        
    试验原理:
        人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。

    自备材料
    蒸馏水。
    加样器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
    振荡器及磁力搅拌器等。

    安全性
    此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性,但没有实验室可*保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病,依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
    避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
    实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
    不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

    人白细胞介素-2ELISA 检测试剂盒

    操作注意事项
    试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
    实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
    不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
    使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
    使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
    洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
    底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
    加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
    按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

    样品收集、处理及保存方法
    血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
    细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

    洗涤缓冲液(20×)的稀释:蒸馏水20倍稀释。

    人白细胞介素-2ELISA 检测试剂盒

    操作步骤
    使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
    根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
    加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
    甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作四次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
    每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育15分钟。避免光照。
    取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
    在450nm波长处测定各孔的OD值。

    结果分析
    以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-2 标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-2 含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

    局限
    6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

    人白细胞介素-2ELISA 检测试剂盒

    试剂盒性能
    灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
    特异性:不与人其它细胞因子反应。
    重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

    Catalase, suspension 过氧化氢酶 [9001-05-2] 2g
    Catechol 邻苯二酚 [120-80-9] 100g
    Chitin 几丁质 [1398-61-4] 500g
    Chlorazol black E 卡拉唑黑E [1937-37-7] 25g
    Chloroform:isoamyl alcohol (24:1) / 100ml
    Catechol violet 邻苯二酚紫 [115-41-3] 25g
    Cedar wood oil 香柏油 [8000-27-9] 25ml
    Cefotaxime, sodium salt 头孢噻肟钠 [64485-93-4] 100g
    Celestine blue B 天青石蓝 [1562-90-9] 25g
    Cell Isolation Optimizing System 细胞分离试剂盒 / 1kit
    D-(+) Cellobiose D-纤维二糖 [528-50-7] 25g
    Cellulase 纤维素酶 [9012-54-8] 1g
    Cellulose, Microcrystalline 微晶纤维素 [9004-34-6] 100g
    Cellulose acetate 乙酸纤维素 [9004-35-7] 100g
    Cephalosporin C, sodium salt [51762-04-0] 25g
    Cephalosporin C, sodium salt [51762-04-0] 100g
    Chicago sky blue  6B 滂胺天蓝 [2610-05-1] 25g
    Cephalexin monohydrate 头孢氨苄 [15686-71-2] 250mg
    Cephalexin monohydrate 头孢氨苄 [15686-71-2] 5g
    Cephalexin monohydrate 头孢氨苄 [15686-71-2] 25g
    Cerium(III) acetate hydrate 乙酸铈 [206996-60-3] 50g
    Cerium(III) carbonate, hydrate 碳酸铈 [54451-25-1] 50g
    Cerium (III) chloride, heptahydrate 化铈七水 [18618-55-8] 50g
     

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