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ELISA检测试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本含量。应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样品浓度。
ELISA检测试剂盒的具体注意事项:
1、要注意避免出现yanzhong溶血。血红蛋白中含有血红素基团,大鼠白介素23(IL23)检测试剂盒其有类似guoyang化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
2、样本的采集及血清分离中要注意尽量避免无菌污染,大鼠白介素23(IL23)检测试剂盒一则无菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些无菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生性干扰。
3、血清标本如是以无菌操作分离,大鼠白介素23(IL23)检测试剂盒则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。
4、冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
5、标本在保存中如出现无菌污染所致的混浊或絮状物时,ELISA检测试剂盒应离心沉淀后取上清检测。
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