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    ELISA常见问题和处理

    发布时间: 2016-06-06  点击次数: 1360次

    问题  可能原因 解决方法
    1、无颜色  试剂孵育的时间没有按说明书操作。  确定生物素化抗体,连接的HRP试剂或链霉亲和素-HRP使用的时间是否适当。
    2、不同试剂盒或不同批号的试剂混用。 重新检查试剂的标签,确准所有组分都属于正使用的试剂盒中的。不能混用不同试剂盒或不同批号的试剂。
    3、漏加酶  检查操作流程,注意不要漏加
    4、HRP酶污染了叠氮钠  使用新配制的试剂,禁含叠氮钠  标准品有问题(若在标本孔中有信号) 按说明书检查标准品的制备使用1瓶新标准品    
    某一容器未洗净,残留灭活酶物质  
    尽可能用试剂盒内容器,另觅一定要洁净、可靠使用含血清的缓冲液配制/复溶抗体 重新确认所选用的试剂    .
    漏加显色剂A或B  
    加显色剂后观察一下液面高度    
    试剂配制/使用有误  
    将实验重做;严格按说明书操作,每次配制和使用前看清标签。    
    缓冲液污染  
    配制新新鲜的缓冲液    
    显色弱  
    超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。
    检查产品的有效期    
    加入试剂的体积和时间有误
    确定所使用的每一个试剂的体积正确的和加入的时间是适当的。  
    试剂、样品用前未能平衡  用前试剂、样品置室温平衡10分钟左右   

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