酶联免疫试剂盒（Elisa）是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定，易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，目前已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
试剂盒操作看似简便，但要做到十分却也是个技术活。它对实验室操作的环境以及操作人员的操作的熟练程度有着较高的要求。由于大部分的试验操作步骤都是由实验人员来完成的，人为的误差相对严重一些。再此本人结合了自己的工作实践向大家分享一下酶联免疫试剂盒操作时的注意事项。
?实验室的环境要干净，防止空气中的一些细菌或粉尘对实验造成干扰。?一般的酶联免疫试剂盒中的酶标抗体是以辣根过氧化物酶（HRP）进行标记
的。因此要求样本不能含叠氮钠（NaN3），因为NaN3是HRP的抑制剂。?如果样本是血清，应该充分离心，不得有颗粒。
?试剂盒应在保质期内使用。不同批次的试剂盒中的溶液不得混用。?在进行酶联免疫实验之前，应该将试剂盒放置室温平衡30min以上。?稀释溶液时，应按照说明书的要求进行稀释。尽量选用去离子水或双蒸
水进行稀释。
?要正确使用移液器，吸取液体要，枪头上不得留有气泡。吸取不同的液
体时，要注意更换枪头。
?加样时要悬臂加样，避免枪头和孔内液体接触。
?建议所有的样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。?孵育时需将微孔用封板膜或保鲜膜封好，防止水分的蒸发。且封板膜不得重
复使用。
洗板时，要注意防止孔间的交叉污染。
?由于底物显色剂对光较敏感，因此进行显色时，应注意避光。
?底物显色剂为TMB，应避免与皮肤接触。终止液为2M浓硫酸，具有腐蚀
性，应避免与皮肤接触。
?酶标仪使用前，应先预热30min。读取结果前，轻轻震荡，使溶液均一。读
数据时应擦干酶标板底部，且孔内不能有气泡。
?酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。