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造血祖细胞的集落培养
发布时间： 2012-12-14 点击次数： 2164次以往CFU-GM培养的刺激物多用人白细胞、胎肌以及胎盘裂解液作为条件培养基等,现多用造血生长因子替代.这些细胞因子包括GM-CSF、G-CSF、M-CSF以及IL-3等,但常用GM-CSF.培养基多用IMDM,RPMI等,培养基常用琼脂以及甲基纤维素,但效果前者较好.
培养体系包括20%-30%胎牛血清,50ng/mlGM-CSF,细胞悬液中细胞总数一般以（1-2）X10^5/ml为宜,其余用IMDM或RPMI补齐,但保持琼脂终浓度为0.3%,甲基纤维素终浓度为0.9%-1.0%.细胞一般置于直径为33mm的培养皿或6孔板中,于37℃、5%CO2饱和湿度环境下培养.
（1）集落计数 一般培养10-14天观察集落,大于40个细胞的细胞团为一个集落.
（2）集落形态 一般CFU-GM的形态分3种.
致密型 细胞紧密成团,细胞个体较小,对为粒细胞为主的集落.
混合型 细胞团中央为紧密成团的粒细胞,周围弥散分布着单核细胞或巨噬细胞.
松散型 细胞团比较均匀地分散,细胞个体较大,多为单核细胞和巨噬细胞组成.
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