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    科研试剂盒实验中缓冲溶液等试剂的配置

    发布时间: 2013-08-21  点击次数: 1273次

    ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础,ELISA试剂盒以及各种溶液如何配置?zui近刚做了下ELISA实验,把各种ELISA配置方法汇总如下:
    (1) ELISA实验包被缓冲液
    (2) ELISA实验洗涤缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液
    (3) ELISA实验稀释液;
    (4)ELISA实验终止液
    (5)ELISA底物缓冲液
    (6)ELISA实验TMB
    (四甲基联苯胺)使用液
    (7) ELISA实验ABTS使用液
    (8)ELISC。

    试剂

    (1) ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):

    NaHCO3 1.59克

    NaHCO3  2.93克

    加蒸馏水至1000ml

    (2) ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS):0.15M

    KH2PO4       0.2克

    Na2HPO4·12H2O  2.9克

    NaCl        8.0克

    KCl         0.2克

    Tween-20 0.05%  0.5ml

    加蒸馏水至1000ml

    (3) ELISA实验稀释液:

    牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

    加洗涤缓冲液至100ml

    或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。

    (4)  ELISA试剂盒 实验终止液(2M H2SO4):

    蒸馏水178.3ml,逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。

    (5) ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):

    0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

    0.1M 柠檬酸(19.2克/L)      24.3ml

    加蒸馏水50ml。

    (6) ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液:

    TMB(10mg/5ml无水乙醇) 0.5ml

    底物缓冲液(PH5.5)    10ml

    0.75%H2O2 32μl

    (7) ELISA实验ABTS使用液:

    ABTS        0.5mg

    底物缓冲液(PH5.5)  1ml

    3%H2O2 2μl

    (8)ELISA实验封闭液:

    牛血清白蛋白(BSA) 5克

    加洗涤缓冲液至100ml。

    值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合长期保存。

    生物帮推荐 ELISA试剂盒 相关产品,详情见:封闭试剂、终止溶液、封闭肽、ELISA稀释液、ELISA试剂盒、ELISA缓冲液、ELISA洗脱缓冲液

    为了保证ELISA实验的准确性,实验操作中加入的缓冲液和各组分一定要,将洗涤液加入酶标板中的时候防止加入的试剂混入另外一个酶标孔,严防交叉污染。

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