酶联免疫吸附试验ELISA试剂盒因其操作简单，灵敏度高，特异性好，经济安全等特点而在临床上广泛应用，但是由于其操作步骤复杂，一般包括试剂准备，样本收集，加样，温育，洗涤，显色，比色，结果判定等，其中任何一项操作不当都会对检测结果产生很大影响。因此，必须加强ELISA检测的全面质量控制，保证其结果的准确可靠。Elisa实验结果的影响因素包括检测样品因素、操作因素等。在实验操作的过程中有一些技术要点。
ELISA试剂盒操作
1、加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
2、作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。
3、剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
4、同批号试剂组分不得混用。
5、洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。
6、每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
7、要确保微量加样器的准确性，可以使用蒸馏水和电子天平进行确定(由于蒸馏水不含杂质，温度环境为20%左右时，lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其zui高量程和zui低量程进行确定。
8、在使用微量加样器时，吸取不同瓶子中液体后要更换枪头，即使吸取标准品溶液。
9、吸取液体时
速度不易太快，以免产生气泡，吸取的量不够准确。
10、手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15～30s，不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中，防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
11、底物为TMB，避免与皮肤相接触。终止液为2tool的浓硫酸具有腐蚀性，应尽量避免接触皮肤。
ELISA检测操作步骤复杂，ELISA试剂盒可能会影响测定结果的因素较多，分布在测定操作的各个步骤中，因此必须加强各环节的质量控制，才能得到准确可靠的检测结果。