关于科研人员来说ELISA试剂盒实验的原理和操作过程并不生疏，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，操作过程中夹杂着洗刷和关闭过程。但是，即使是平淡无奇的洗刷和关闭，假如操作不合理，也会很大程度上影响实验的度。实验结束时咱们是否能取得有意义并且的信息，这在很大程度上取决于成果的信噪比，布景噪音会在很大程度上影响科研人员对成果的判别。
关于如安在实验过程中下降ELISA试剂盒布景要素的影响，下面介绍一些过程关键。
洗刷很重要
洗刷过程看似很简单无聊，本来很重要，由于假如未的材料(如非特异的抗体或检查试剂)残留在微孔板中，就会添加布景噪音。如有必要，可添加洗刷液中的盐浓度，这会阻挠非特异反应。假如布景过高，置疑洗刷不行，能够测验添加洗刷次数。
关闭更关键
关闭液的作用是让不相关的蛋白占有微孔板中潜在的位点。这就下降了可发生信号的抗体非特异的时机。实验过程中到达抗体只与意图蛋白的目标。假如布景过高，置疑关闭不充分，能够测验运用更高浓度的关闭液，或恰当延伸关闭时刻。
假如您一直被布景疑问所困扰，那就应当花些时刻来优化关闭液。这也许需求时刻，但也是值得的。目前主要有两种类型的关闭液：蛋白和非离子型去污剂。运用的类型须取决于多个要素，包含微孔板的外表试剂、吸附的抗原、您的抗体和检查试剂。好的关闭液应下降非特异性，但它不应当与抗原、抗体或检查试剂发作相互作用。
ELISA试剂盒zui常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种关闭液廉价、安稳，在去除洗刷过程中的一些非特异上很有用。但它们只在存在时起作用，由于很简单被洗掉。因而所有洗刷液中也有必要添加关闭液。请勿运用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%)，它会下降特异，发生假阴性。另一个挑选是运用蛋白和非离子型去污剂这两种关闭液，后者可帮忙洗刷过程中的关闭。
蛋白关闭液则有所不一样，是持久的。它们与敞开位点并关闭，ELISA试剂盒一起安稳与微孔板的抗原分子。常用的蛋白关闭液包含牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。血清组分的内在多样性可使它有用拦截许多不一样类型的分子相互作用。不过，它的缺陷在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。处理这个疑问的一种办法是运用鸡或鱼的正常血清。
抗体浓度须优化
一般咱们会模仿“实验前辈”留下来的操作过程进行实验，但是假如试剂稍有不一样，则也许需求优化抗体的量。记住，非特异的抗体会添加布景。为了避免这一点，切勿运用过多的一抗或二抗。
检查试剂要适当
另一点也很清楚明了：ELISA试剂盒切勿运用过多的检查试剂。假如浓度过高，或者未正确稀释，则会致使高布景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应参加停止液。
假如ELISA遇到了高布景，那么也无需太忧虑，顺次检查ELISA体系中的组分，并扫除也许存在的疑问。尽心优化，信任很快就会有有意义并且的实验成果。