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    ELISA试剂盒切片组织处理实验步骤

    发布时间: 2017-12-05  点击次数: 1813次

    ELISA试剂盒实验不建议固定组织24小时以上,因为固定过度可能导致抗原的遮蔽。
    组织在固定后可转移至酒精中,直至包埋过程。
    因为石蜡与水是不混溶的,ELISA试剂盒所以组织在加入熔化的固体石蜡前必须脱水。
    脱水是通过浸润在浓度递增的酒精中而实现的。
    这种方法逐步改变疏水性,让细胞伤害zui小化。脱水之后,组织与二甲苯共同孵育,以去除任何残留的酒精。
    仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
    通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
    离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
    仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    固定可通过灌注或解剖后立即浸润来实现,一般需要4-24小时。
    石蜡一般加热到60?C进行包埋,随后经过一夜硬化。
    血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
    仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
    尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
    ELISA试剂盒利用切片机用锋利的刀片将组织切成超薄的切片。切片在显微镜载玻片上干燥,并长时间室温储存。
    组织切片在开始IHC/ICC步骤之前必须再水化。
    研究人员发现,当实验鼠的食物中含有较多糖分时,由此产生的葡萄糖会妨碍这种细胞的功能,使其分泌下丘脑泌素的量减少,从而让实验鼠易困。
    如果食物中含有较多的蛋白质,ELISA试剂盒由此产生的则能起到相反的效果,有助实验鼠保持清醒。
    仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
    组织在用石蜡包埋之前必须固定。
    细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
    标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
    若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
    不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
    石蜡包埋为长期保存组织样本提供了合适选择。
    血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
    仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
    ELISA试剂盒石蜡是组织包埋的*也是zui常用的物质。

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